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Année : 2011
Tome : 162
Volume : 5
Pages : 252-257
Titre : Test d'amplification NASBA (nucleic acid sequence based amplification) pour la détection du virus de la diarrhée bovine dans les plasmas, sera et biopsies auriculaires, testés individuellement ou par pool
Auteurs : A. GANÉE, F. POYET-GELAS, S. GROSZ, C. MABILAT
Résumé : Le test d'amplification NASBA® (nucleic acid sequence-based amplification) a été mis au point pour détecter le virus de la diarrhée bovine (BVDV) à partir de sera de veaux et de plasmas bovin. Ce test est aussi applicable pour détecter le virus à partir de biopsies auriculaires bovines. Ce test NASBA a été comparé avec la méthode ELISA (antigen-capture enzyme-linked immunosorbent assay) sur 36 sera de veaux BVDV-positifs, 6 plasma bovins BVDV-positifs, et 82 plasma bovins BVDV-négatifs. Les résultats montrent une corrélation de 100% pour les sera de veaux positifs, et de plus le test NASBA détecte 2 plasmas supplémentaires ayant un statut BVDV-positif. Le test NASBA a également été comparé à un test d'amplification RT-PCR expérimentale sur 53 autres plasmas positifs et 136 négatifs. Le test NASBA a détecté 51 plasma positifs et 138 plasma négatifs (les pourcentages d'agréments positifs et négatifs étaient respectivement de 92.5% et 98.5%). Chaque échantillon testé individuellement a également été testé en pools simulés de 10 échantillons, le pourcentage total d'agrément entre échantillons individuels et pools étant alors de 100%. De plus, à partir de 201 biopsies auriculaires de vaches ayant un statut BVDV inconnu, le test NASBA a détecté un seul échantillon positif. Lorsque chaque biopsie auriculaire a été testée en pools réels de 10 échantillons (n = 48), le pourcentage total d'agrément était de 100%. En conséquence, l'utilisation du test NASBA et de l'analyseur EasyQ®, couplés à l'extraction sur EasyMAG® est un outil automatisé, précis et rapide pour le dépistage du statut BVDV à partir d'échantillons, qu'ils soient testés individuellement en pools.
Mots clés : Virus de la diarrhée bovine, bétail, NASBA, EasyMAG, ELISA, reverse transcription-polymerase chain reaction, plasma, sérum, biopsie auriculaire, pools d'échantillons
Correspondance : C. MABILAT
Adresse : BioMérieux S.A., Centre Christophe Mérieux, 5 rue des berges, Grenoble Cedex 01, 38024 FRANCE. Corresponding author: claude.mabilat@biomerieux.com
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