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Année : | 2007 |
Tome : | 158 |
Volume : | 10 |
Pages : | 504-508 |
Titre : | Analyse HPLC de la zéaralénone et de ses métabolites réduits dans des fractions S9 de foie de canard |
Auteurs : | M. KOLF-CLAUW, F. AYOUNI, D. TARDIEU, P. GUERRE |
Résumé : | L’analyse HPLC de la zéaralénone (ZEA), des zéaralénols (?-ZOL et ß-ZOL) et zéaralanols (?-ZAL et ß-ZAL) a été mise au point pour disposer d’une méthode sensible et reproductible pour quantifier la ZEA et ses métabolites réduits dans des fractions hépatiques subcellulaires. Le métabolisme in vitro optimal a été observé après incubation de 5 mg de protéines de S9 avec 0.016 ?mol de ZEA. L’acétonitrile et des mélanges diéthyléther/ chlorofome ont été comparés pour l’extraction, ainsi que différentes phases mobiles et deux détecteurs pour l’analyse HPLC. Les échantillons extraits élués avec un mélange eau/acétonitrile (55:45, v/v) à un débit de 1.0 ml/min-1, ont conduit à des pics bien séparés entre ZEA et ses métabolites réduits. Les limites de détection ont été comprises entre 0.5 et 2 ng/mg de protéines avec détection UV, et entre 0.04 et 4 ng/mg de protéines avec détection fluorimétrique. Cette dernière a montré une sensibilité dix fois supérieure à l’UV pour la ZEA et l’?-ZOL. La répétabilité (10 répétitions) a été de 2.7% à 6.99% pour les zéaralénols. Les coefficients de variation jour-à-jour mesurés en détection UV ont été de 3.3% à 8.5% et de 2.5% à 4.3% pour la zéaralénone et les zéranols, respectivement. Cette méthode appliquée à des S9 de canard incubés 30 minutes avec de la ZEA a permis de montrer que l’?-ZOL constitue le principal métabolite réduit chez le canard. La méthode décrite est particulièrement adaptée à l’étude du métabolisme in vitro et aux variations interspécifiques. |
Mots clés : | Zearalénone, zéaralénols, fraction S9 hépatique, canard, métabolisme, HPLC. |
Correspondance : | M. KOLF-CLAUW |
Adresse : | Unité de Mycotoxicologie, Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse, 23 chemin des Capelles, BP 87214, 31076 Toulouse Cedex FRANCE - [email protected] |
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